药厂净化棚沉降菌测试标准操作规程

 

1、菌体：细菌检查后，由一个或好多个细菌繁殖而产生的一病菌集落，通称CFU。通常用数量表明。

2、测试标准：地基沉降法，即利用当然地基沉降基本原理搜集在空气中的微生物物体于培养液培养皿，经48个小时以上塑造，在适合的标准下让其繁衍到可以看到的菌体数，来鉴定清洁自然环境内的活微生物菌种数，并借此来鉴定净化棚的洁净度等级。

3、常用的仪器设备和机器设备

1）髙压消毒锅：应用时参考文档GZ-ZL-SOP-066-00开展实际操作。

2）恒温培养箱：务必按时对培养箱的温度表开展计量检定。

3）细胞培养皿：一般选用中90mm×15mm硼氯化镁夹层玻璃细胞培养皿。应用前将细胞培养皿放置121℃湿热灭菌20分鐘。

4、培养液：一般营养成分琼脂培养液。将培养基加温融化，制冷至约45℃在无菌技术前提下将培养液引入细胞培养皿，每皿约15m1。待琼脂培养液凝结后，将培养液培养皿放进30～35℃恒温培养箱中塑造数钟头，若培养液培养皿上确实没有菌体生长发育，就可以供取样用，制取好的培养液培养皿应在2～8℃的条件中储放。

5、测试流程

1）取样方式：将已制取好的细胞培养皿置放在预先确定的抽样点，开启细胞培养皿盖，使培养液表层曝露0.5钟头，再将细胞培养皿盖紧盖后颠倒。
2）塑造，時间不少于48钟头。每次培养液应该有对比实验，查验培养液自身是不是环境污染，可每次选中3只细胞培养皿作对比塑造。

3）菌落计数：用人眼立即记数，随后用5～10倍高倍放大镜查验，有无忽略。若细胞培养皿上面有2个或2个以上菌体重合，可辨别时仍以2个或2个以上的菌落计数。

6、常见问题

1）检测用品要做杀菌解决，以保证检测的稳定性、准确性。

2）采用一切对策避免 人为因素对样版的环境污染。

3）对培养液、塑造标准以及他主要参数作详尽的纪录。

4）因为病菌品种繁多，区别甚大，记数时一般用电子散射光于细胞培养皿反面或正脸认真观察，不必漏计细胞培养皿边沿生长发育的菌体，并须留意细菌菌落与培养液沉淀的棚别，必需时要高倍显微镜辨别。

5）取样前要认真仔细每一个细胞培养皿的品质，如发觉质变、损坏或环境污染的应去除。

7、检测标准

1）测试状态

（1）沉降菌检测前：被测试净化棚（棚）的温湿度记录须做到要求的规定，负压差、务必操纵在标准值内。被检测净化棚（棚）已消毒。

（2）测试状态有静止和信息二种，并在汇报中标明测试状态。

（3）测试工程师：测试人员务必配戴合乎自然环境洁净度等级等级的工作服装。静态数据检测时，棚里测试工程师不可超过2本人。

2）检测時间

（1）对单边流，如100级净化棚间内及层.流操作台，检测应在净化空调机组正常的运作不少于10分鐘后逐渐。

（2）对非单方面流，如10000级、100000级以上的净化棚间，检测应在净化空调机组正常的运作不少于30分鐘逐渐。

8、沉降菌记数
1）至少取样点数量：可按表1明确。在达到至少测等级的与此同时，还宜达到至少细胞培养皿数，见表2。

表1至少取样点数量

总面积(m2)	洁净度等级等级
	100	10000	100000	300000
＜10	2～3	2	2	2
≥10～＜20	4	2	2	2
≥20～＜40	8	2	2	2
≥40～＜100	16	4	2	2
≥100～＜200	40	10	3	3

注：表格中的总面积针对单边流净化棚就是指排风总面积，针对非单方面流净化棚就是指棚间总面积。

表2至少细胞培养皿数

洁净度等级等级	所需Φ90mm细胞培养皿数（以地基沉降0.5钟头计）
100	14
10000	2
100000	2
300000	2

2）取样点的布局：工作中棚测试用例部位距地0.8～1.5m上下（稍高于工作台面）。可在主要设备或重要工作中主题活动范畴处提升测量点，取样点的安排应务求匀称，防止取样点在某 部分棚域过度集中化，某部分棚域过度稀少。

3）纪录：检测报告中应纪录棚间溫度、空气湿度、压力差、测试状态及数据测试。

4）結果测算：用记数方式得到每个细胞培养皿的菌体数。

均值菌体数的测算见上式：m1 m2 …… mn

均值菌体数m=n

式中：m为均值菌体数；m1为1号细胞培养皿菌体数；m2为2号细胞培养皿菌体数；mn为n号细胞培养皿菌体数；n为细胞培养皿数量。

5）結果鉴定：用均值菌体数分辨净化棚的空气中的微生物菌种。

6）净化棚（棚）内的均值菌体数务必小于所选中的标准（见表3）。

表3

清洁等级	100级	10000级	100000级	300000级
规范（均值）	1个/皿	3个/皿	10个/皿	15个/皿

7）若某净化棚（棚）的平均菌体数超出标准，则务必对于此事棚域优先消毒杀菌，随后再次检测2次，检测結果务必达标。

 

关键论文参考文献：国家行业标准GB/T 16294-1996

 

全文由来：http://www.dcjjp.com/