一次性使用卫生用品卫生标准  GB15979-2002

前  言

本规范原文强制性

GB15979-1995《一次性使用环境卫生 用具卫生标准》自1996年公布至今，使制造业企业确立了卫生要求和总体目标，管理方法单位 也拥有监管检验根据，对促进该领域的身心健康发展趋势与环境卫生水准的提升发挥了主动功效。此外，伴随着产品品种与资料的发展趋势，该规范有一些地区必须健全。因而明确提出修订本规范。

本标准自执行之日起替代GB1579-1995.

本规范的附则A至附录G为规范的附则。

本规范由我国国家卫生部明确提出。

本规范承担拟定企业：上海疾病防治监测中心；参与拟定企业：宝洁（我国）有限责任公司、强生（我国）有限责任公司。

本规范关键起草人：沈伟、卢敏、杨宏平、缜密、潘希和、刘育京。

 

 

我国国家行业标准

           一次性使用卫生用品卫生标准  GB15979-2002

Hygienic standard for disposable sanitary products    替代GB15979-1995

 

 

1、范畴

本标准了一次性使用卫生用品的设备和工作环境卫生标准、消毒杀菌实际效果微生物检测点评规范和相对应检测方式，及其原料与商品生产制造、消毒杀菌、存储、运送全过程卫生要求和商品标志规定。

在本规范中，一次性使用卫生用品就是指：

本规范应用与中国从业一次性使用卫生用品的生产制造与售卖的单位、企业或本人，也适用经销商進口一次性使用卫生用品的单位、企业或本人。

2、引入规范

以下规范所包括的条款，根据在本规范中引入而组成为本规范的条款。本规范出版发行时，所显示版本号均为合理。全部规范都是会被修定，应用本规范的个方应讨论应用以下规范最新版的概率。

GB 15981-1995    消毒与灭菌实际效果的评价方法与规范

3、界定

本规范使用以下界定。

一次性使用卫生用品

应用一次后即丢掉的、与身体同时或间接接触的、并为做到人体系统环境卫生或健康教育（抑菌或抗菌）目地而采用的各种各样日常日常生活用品，商品特性可以是固态还可以使液态。例如，一次性使用手套或护指（包含卫生护垫）、尿不湿等粪便卫生用品（不包括走稳纸巾等洗手间用纸）、安全套等，在本规范中统称之为“卫生用品”。

4、商品食品卫生标准

4.1  外型务必干净整洁，合乎该卫生用品原有特性，不可有不正常气味与脏东西。

4.2  不可对肌肤与黏膜造成异常刺激性与人民反映以及他危害功效。

4.3  商品须合乎表1中分子生物学指标值。

表1

产品品种	微生物菌种指标值
	原始环境污染菌1) cfu/g	细菌菌落数量cfu/g或cfu/mL	大肠杆菌	高致病溃烂菌2）	细菌菌数cfu/g或cfu/mL
手套或护指、卫生纸、湿纸巾、內裤、电話膜 抑菌（或抗菌）液态商品 卫生湿巾 口罩   普通   消毒杀菌级 女性生理期日用品   普通   消毒杀菌级 尿不湿等粪便日用品   普通   消毒杀菌级 安全套	≤10000     ≤10000     ≤10000	≤200 ≤200 ≤20   ≤200 ≤20   ≤200 ≤20   ≤200 ≤20 ≤20	不可验出 不可验出 不可验出   不可验出 不可验出   不可验出 不可验出   不可验出 不可验出 不可验出	不可验出 不可验出 不可验出   不可验出 不可验出   不可验出 不可验出   不可验出 不可验出 不可验出	≤100 ≤100 不可验出   ≤100 不可验出   ≤100 不可验出   ≤100 不可验出 不可验出
1）如初见环境污染菌超出表内标值，应相对提升消灭指数值使做到本标准的病菌与细菌限制值。     2）高致病溃烂菌指铜绿假单胞菌、橙黄色金黄葡萄球菌与溶血性链球菌。

4.4  卫生湿巾除务必做到表1中的分子生物学规范外，对大肠埃希菌和金黄葡萄球菌感染的消灭率须≥90%，如需标出对细菌的功效，还须对白色念珠菌的根除率≥90%，其消菌在棚温下最少须维持1年。

4.5  抑菌（或抗菌）商品出务必做到表1中的类似平级商品分子生物学规范外，对大肠埃希菌和金黄葡萄球菌感染的抗菌率须≥50%（溶出物性）或＞26%（非溶出性），如需标出对细菌的功效， 还须白色念珠菌的抗菌率≥50%（溶出物性）或＞26%（非溶出性），其杀菌作用在棚温下最少须维持1年。

4.6  一切经环氧乙烷消毒杀菌的日用品在出厂时，环氧乙烷残余量务必≤250ug/g。

5、工作环境食品卫生标准

5.1  安装与包裝棚空气中细菌菌落数量应≤2500cfu/m³.

5.2  操作台表层细菌菌落数量应≤20cfu/cm².

5.3  职工手表层细菌菌落数量应≤300cfu/支手，并不可验出病原菌。

6、消毒杀菌实际效果微生物检测点评

6.1  环氧乙烷消毒杀菌：对枯草杆菌灰黑色变异芽胞（ATCC 9372）的消灭指数值≥10³.

6.2  电磁波辐射消毒杀菌：对简短链球菌芽胞E6d（ATCC 27142）的消灭指数值应≥10³.

6.3  工作压力蒸汽消毒：对嗜热人体脂肪链球菌（ATCC 7953）的消灭指数值应≥10³.

7、测试标准

7.1  商品测试标准

7.1.1  商品外型：估测，应合乎本规范3.1的要求。

7.1.2  商品毒理测试标准：见附则A。

7.1.3  商品微生物检验方式：见附则B。

7.1.4  商品除菌特性、抗菌特性与稳定性测试方式：见附则C。

7.1.5  商品环氧乙烷残余量测试标准：见附则D。

7.2  工作环境取样与测试标准：见附则E。

7.3  消毒杀菌实际效果微生物检测评价方法：见附则F。

8、原料卫生要求

8.1  原材料应无毒性、无害、零污染；原材料包裝应清理，清晰说明内含物的名字、生产制造企业、生产制造日期或生产批号；危害环境卫生医治的与原材料应不外露；有特殊要求的原材料应标明储存情况和保存期。

8.2  对危害商品环境卫生品质的原材料应该有相对应检测报告或证明文件，必需时要开展微生物菌种监管和采取有效对策。

8.3  严禁应用废旧的日用品作原材料或半成品加工。

9  工作环境与全过程卫生要求

9.1  生产制造棚周边环境应干净整洁，无废弃物，无蚊、蝇等虫害蚊蝇滋生。

9.2  生产制造棚应该有充足室内空间达到生产制造必须，合理布局一定要合乎生产工艺流程规定，切分有效，人、物分离，商品步骤中无反向与交叉式。原材料进到与制成品出来应该有污染治理对策和严谨的安全操作规程，降低工作环境微生物菌种环境污染。

9.3  生产制造棚里应配备合理的防污、防蛀、防鼠措施，路面、墙壁、设备工作台应整平、光洁、不起尘、有利于除灰与清理消毒杀菌，有足够的灯具与室内消毒或净化处理对策，以确保工作环境达到本规范第5章的要求。

9.4  配备必不可少的制造和质量检测机器设备，有完善的制造和质量检测纪录，进一步确保商品环境卫生品质。

9.5  生产过程中用易燃性、易燃易爆物件或造成有害物的，必不可少具有相对应安全性防护措施，合乎国家相关 规范或要求。

9.6  原材料和制成品应单独堆积，待检、达标、不过关原材料和制成品应严苛分离堆积并设显著标示。库房内要干躁、清理、自然通风，设防蛀、防蝇设备和垫仓板，合乎商品储存标准。

9.7  进到生产制造棚要跳槽衣和劳保鞋，戴工帽，直接接触裸装商品的工作人员需佩戴口罩，清理和消毒杀菌两手或戴手套；生产制造棚前应相对应配有换衣棚、洗手台、消毒池与缓存棚。

9.8  从业日用品生产制造的技术人员应维持清洁卫生，不可留手指甲，工作中时不能戴饰品，长头发应卷在工帽内。急性肠炎、副伤寒、慢性乙型肝炎、活动性肺结核、尖锐湿疹、非淋及病毒性或渗出性皮肤疾病病人或医院病毒携带者不可进行立即与设备了解的制造主题活动。

9.9  从业日用品生产制造的技术人员应在入岗前及按时（每一年一次）开展健康体检与卫生保健知识（包含生产制造环境卫生、清洁卫生、相关规范与标准）学习培训，录取者即可入岗。

10、消毒杀菌全过程规定

10.1  消毒杀菌级商品最后消毒杀菌务必选用环氧乙烷、电磁波辐射或工作压力蒸气等合理消毒方法。常用消毒机务必满足相关卫生管理制度。

10.2  依据商品卫生管理制度、 原始环境污染菌与消毒杀菌实际效果微生物检测点评规范制订消毒杀菌程序流程、性能参数、工作规范，工作经验证后严格执行即定的消毒杀菌加工工艺实际操作。该消毒杀菌程序流程、性能参数或危害消毒杀菌功效的原材料或生产工艺流程产生变化后应再次认证明确消毒杀菌加工工艺。

10.3  每一次消毒杀菌全过程需要开展相对应的加工工艺（物理学）和有机化学显色剂检测，每月用对应的生物指示剂检测，仅有当加工工艺检测、有机化学检测、微生物检测做到规范规定时，被消毒杀菌物件才可以在出厂。

10.4  商品经杀菌处置后，外型与特性应与消毒杀菌解决前无显著看得见的差别。

11、包裝、运送与存储规定

11.1  实行日用品运送或存储的企业或本人，应严格执行经营者给予的运送与存储规定开展运送或存储。

11.2  立即与产品触碰的包装材料务必无毒性、无害、清理，产品的全部包装材料务必具备足够的密封性和坚固性以做到确保产品在正常情况下的运送与贮存标准下不会受到环境污染的目地。

12、产品标志规定

12.1  产品标志应满足《我国产品质量法》的要求，并在产品包裝上标出实行的卫生管理制度号及其生产制造日期和保存期（有效期限）或生产日期和限制应用日期。

12.2  消毒杀菌级产品还应在市场销售包裝上标明“消毒杀菌级”字眼及其消毒杀菌日期和有效期限或消毒杀菌生产批号和限制应用日期，在运送包裝上标出“消毒杀菌级”字眼及其消毒杀菌企业与详细地址、消毒方法、消毒杀菌日期和有效期限或消毒杀菌生产批号和限制应用日期。

 

附  录 A

（规范的附则）

产品毒理测试标准

A1  各种产品毒理检测指标值

当原料、生产工艺流程等产生变化很有可能危害产品毒副作用时，应按表A1依据不一样产品类型给予合理的（经政府部门确认的第三方）制成品毒结构力学检测报告。

表A1

产品类型	肌肤刺激性实验	阴道粘膜刺激性实验	肌肤超敏反应实验
胶手套或护指、內裤	√		√
抑菌（或抗菌）液态产品	√	依据应用领域挑选1）	√
湿巾、卫生湿巾	√	依据用途选择1）	根据材料选择
口罩	√
女性生理期日用品		√	√
尿不湿等粪便日用品	√		√
安全套		√	√
1）用以正确引导黏膜的商品须做正确引导黏膜刺激性实验，但不必做肌肤刺激性实验。

A2  试验方法

皮肤刺激试验、正确引导黏膜刺激试验和皮肤变态反应试验方法按国家卫生部《消毒技术规范》（第三版）第一手册《实验技术标准》（1999）中的“消毒液毒理实验技术性”中相对应的试验方法开展。

固态商品的试品制取方法依照A3开展。

注

1、用以皮肤刺激试验中的空白试验应是：盐水和斑纸贴。

2、在皮肤变态反应中，致敏物解决和激起解决使用的使用量保持一致。

A3  试品制取

A3.1  皮肤刺激试验和皮肤变态反应试验

以横断面方法剪一块斑贴尺寸的商品。针对干的商品，如尿不湿、女性生理期日用品，用盐水湿润后贴住皮肤上，再用斑纸贴遮盖。

A3.2  正确引导黏膜刺激试验

A3.2.1  干的商品（如女性生理期日用品）

以横断面方法裁取充足量的商品，按1g/10mL的比率添加杀菌盐水，密封性于提纯器皿中拌和后放置37℃±1℃下置放24h。制冷到棚温，拌和后析抽样液备检。

A3.2.2  湿的商品（如卫生湿巾）

在开展阴道粘膜刺激试验的当日，挤压湿纸巾里的加上液做为试件。

A4  判断规范

以国家卫生部《消毒技术规范》（第三版）第一手册《试验技术标准》（1999）中“毒理试验結果的最后判断”的相对应一部分做为试验結果判断标准。

 

附则B

（规范的附则）

商品微生物检验方法

B1  商品收集与试品解决

于同一批号的三个运送包裝中最少提取12个最少售卖包裝试品，1/4样品用以检验，1/4试品用以备用，另1/2试品（可就地保存）必需时用以复查。取样的最少售卖包裝不应该有开裂，检测前不可启开。

在100级净化处理标准下用无菌检测方式开启用以检验的最少3个包裝，从每一个包裝中抽样，精确称量10g±1g试品。剪下来后添加到200mL杀菌生理盐水中，充足搅拌，获得一个生理盐水样液。液态商品用源液立即做样液。

如被检试品带有很多吸水树脂原材料而致使不可以吸出足够样液时，封闭液量可按每一次50mL增长，直到能吸出足够检测用样液。在预估细菌菌落数量与细菌菌数时相对应调节稀释液度。

B2  细菌菌落数量与原始环境污染菌检验方式

本办法适用商品原始环境污染菌与细菌菌落数量（下列通称为细菌菌落数量）检验。

B2.1  操作流程

待以上生理盐水 样液当然地基沉降后取上清液做菌落计数。共注射5个培养皿，每一个培养皿中添加1mL样液，随后用制冷至45℃以内的溶化的营养成分琼脂培养液15-20mL倒进每一个培养皿内混和匀称。待琼脂凝结后旋转培养皿置35℃±2℃塑造48h后，测算平板电脑上的菌体数。

B2.2  結果汇报

菌体呈块状生长发育的平板电脑不适合选用；记数符合规定的板材上的菌体，按式（B1）数值：

式中：X₁――细菌菌落数量，cfu/g或cfu/mL；

      A――5块琼脂培养液版本上的细菌菌落数量；

      K――稀释液度。

当菌体数在100之内，按实了解汇报，超过100时才有二位有效数字。

假如试品菌数超出本规范的要求，按B2.3开展复查和結果汇报。

B2.3  复查方式

将存留的复查试品依前法进行复测2次，2次結果均值都做到本规范的要求，则判断被检试品达标；在其中有一切1次結果平均值超过本标准规定，则判定被检样品不合格。

B3  大肠杆菌检验方式

B3.1  操作流程

抽样液5mL，注射50mL乳清蛋白胆盐发醇管，置35℃±2℃塑造24h，如不产酸都不胀气，则汇报为大肠杆菌呈阴性。

如产酸产气，则画线注射伊红美蓝琼脂平板电脑，置35℃±2℃塑造18-24h，观查平板电脑上菌体形状。典型性的大肠菌落为黑紫色或红紫色，环形，边沿齐整，表层光洁潮湿，常具备金属质感，也是有的呈黑紫色，没有或有点金属质感，或淡粉色，核心较深的菌体。

取疑是菌体1-2个作革兰氏染色镜检查，与此同时注射乳清蛋白发醇管，置35℃±2℃塑造24h，观查胀气状况。

B3.2  結果汇报

凡乳清蛋白胆盐发醇管产酸产气，乳清蛋白发醇管产酸产气，在伊红美蓝平板电脑上面有典型性大肠菌落，革兰氏染色为呈阴性无芽孢杆菌，可汇报被检样品验出大肠埃希菌。

B4  铜绿假单胞菌检验方式

B4.1  操作流程

抽样液5mL，添加到50mL SCDLP栽培基质中，充足搅拌，置35℃±2℃塑造18-24h。若有铜绿假单胞菌生长发育，栽培基质表层展现一层薄菌膜，栽培基质常呈浅绿色或深蓝色。从栽培基质的薄菌膜处挑菌塑造物，画线注射十六烷三丙基溴化铵琼脂平板电脑，置35℃±2℃塑造18-24h，观查菌体特点。铜绿假单胞菌在这里培养液上生长发育优良，菌体平扁，边沿不齐，菌体周边培养液有点淡粉色，别的菌不久。

取异常菌体玻片作革兰氏染色，镜检查为革兰氏阴性菌者应开展以下实验。

氧化酶试验：取一小块清洁的乳白色过滤纸片放到杀菌培养皿内，用无菌检测玻棒挑菌异常菌体涂在过滤纸上面，随后在其上滴入一滴新配置的1%二甲基对苯二胺标准溶液，30s内发生粉色或暗紫色，为氧化酶实验呈阳性，不掉色者为呈阴性。

绿脓菌素实验：取2-3个异常菌体，各自注射在绿脓菌素测量用培养液斜坡，35℃±2℃塑造24h，添加三氯甲烷3-5mL，充足震荡使塑造物中也许具有的绿脓菌素融解，待三氯甲烷呈深蓝色时，用塑料吸管移到另一试管婴儿中并添加1mol/L的硫酸1mL，震荡后静置一会儿。如顶层发生粉色或暗紫色即是呈阳性，表明有绿脓菌素存有。

附录C

（规范的附录）

商品除菌性能、抗菌性能与稳定性测试方式

C1  试品收集

为使试品具备较好的象征性，应当同一批号三个运送包裝中最少随机抽取20件最小售卖包裝试品，在其中5件备用，5件做抗菌或除菌性能检测，10件做稳定性测试。

C2  实验菌与菌液制取

C2.1  实验菌

C2.1.1  病菌：橙黄色金黄葡萄球菌（ATCC 6538），大肠埃希菌（8099或ATCC 25922）。

C2.1.2  酵母：白色念珠菌（ATCC 10231）

菌液制取：取菌种第3-14代的营养成分琼脂培养液斜坡新鮮塑造物（18-24h），用5mL 0.03mol/L磷酸盐缓冲液（一下通称PBS）洗下菌苔，使菌飘浮匀称后用以上PBS稀释液至所需浓度值。

C3  除菌性能实验方式

该实验抽样位置，依据被试商品经营者的表明而明确。

C3.1  还原剂评定实验

开展除菌性能检测务必根据下列还原剂评定实验。

C3.1.1  试验分类

    1）染菌样照 5mL PBS

2）染菌样照 5mL 还原剂

3）染菌对相片 5mL 中和剂

4）样片 5mL 中和剂 染菌对照片

5）染菌对照片 5mL PBS

6）同批号PBS

7）同批次中和剂

8）同批号培养基

C3.1.2  点评要求

1）第1组无实验菌，或仅有极个别实验菌菌体生长发育。

2）第2组有较第1组为多，但较第3、4、5组为少的实验菌体生长发育，并符合规定。

3）第3、4、5组有类似量实验菌生长发育，并在1*10⁴-9*10⁴cfu/片中间，其小组之间菌体数误差值应不超过15%。

4）第6-8组无菌检测生长发育。

5）持续3次实验获得达标点评。

C3.2  除菌实验

C3.2.1  操作流程

将实验菌24h斜坡塑造物用PBS洗下，做成菌悬液（规定的含量为：用100uL滴于对比样片上，回收利用菌数为1*10⁴-9*10⁴cfu/片）。

取被试样片（2.0cm*3.0cm）和对仍然片（与试样同质性原材料，同样尺寸，但没有抗菌剂，且经消毒解决）各4片，分为4组置于4个杀菌平皿内。

取以上菌悬液，各自在每一个被试样片和对仍然上面滴入100uL，匀称施胶，逐渐记时，功效2、5、10、20min，用无菌检测镊各自将样照资金投入含5mL相对应还原剂的试管婴儿内，充足搅拌，作适度稀释液，随后取在其中2-3个稀释液度，各自汲取0.5mL，置于2个平皿，用凉至40-45℃的营养成分琼脂培养液（病菌）或沙氏琼脂培养液（酵母菌）15mL作竭尽，旋转平皿，使其充足匀称，琼脂凝结后旋转平板电脑，35℃±2℃塑造48h（病菌）或72h（酵母菌），干活儿菌菌落计数。

实验反复3次，按式（C1）测算除菌率：

           X₃ = （A-B）/A *100%    （C1)

式中：X₃――除菌率，%；

       A――对比试品均值菌体数；

       B――被使试品均值菌体数。

C3.2.2 点评规范

除菌率≥90%，商品有消菌。

C4  溶出物性抗（抑）菌商品抗菌特性实验方式

C4.1  操作流程

将实验菌24h斜坡塑造物用PBS洗下，做成菌悬液（规定的含量为：用100uL滴于对仍然上面或5mL样液内，回收利用菌数为1*10⁴-9*10⁴cfu/片或mL）。

取被试样片（2.0cm*3.0cm）或样液（5mL）和对仍然片或样液（与试样同质性原材料，同样尺寸，但没有抗菌剂，且经消毒解决）各4片（置于杀菌平皿内）或4管。

取以上菌悬液，各自在每一个被试样片或样液和对仍然片或样液上或内滴加100uL，匀称施胶/混和，逐渐记时，功效2、5、10、20min，用无菌检测镊各自将样照或样液（0.5mL）资金投入含5mL PBS的试管婴儿内，充足搅拌，作适度稀释液，随后取在其中2-3个稀释液度，各自汲取0.5mL，置于2个平皿，用凉至40-45℃的营养成分琼脂培养液（病菌）或沙氏琼脂培养液（酵母菌）15mL作竭尽，旋转平皿，使其充足匀称，琼脂凝结后旋转平板电脑，35℃±2℃塑造48h（病菌）或72h（酵母菌），干活儿菌菌落计数。

实验反复3次，按式（C2）测算抗菌率

          X₄ = ( A-B ) / A * 100    （C2)

式中：X₄――抑菌率，%；

   A――对比试品均值菌体数；

   B――被试样品均值菌体数。

C4.2  点评规范

抗菌率≥50%-90%，商品有杀菌作用，抗菌率≥90%，商品有较强杀菌作用。

C5  非溶出性抗（抑）菌商品抗菌特性实验方式

C5.1  操作流程

称量被试样片（裁成1.0cm*1.0cm尺寸）0.75g散装包好。

将0.75g重样片放进一个250mL的三角烧瓶中，各自添加70mL PBS和5mL菌悬液，使菌悬液在PBS中的含量为1*10⁴-9*10⁴cfu/ mL。

将三角烧瓶固定不动于震荡摇床边，以300r/min振摇1h。

取0.5mL振摇后的样液，或用PBS做适度稀释液后的样液，以琼脂竭尽法注射培养皿，开展菌落计数。

与此同时设对比样片组和不用样片组，对比样片组的对照样片与被试样片一样尺寸但没有抑菌成份，别的操作流程均与被试样片组同样，不用样片组各自取5mL菌悬液和70mL PBS添加一个250mL三角烧瓶中，搅拌，各自于0時间和震荡1h后，各取0.5mL菌悬液与PBS的溶液做适度稀释液，随后开展菌落计数。

实验反复3次，按式（C3）测算抗菌率：

     X₅ = （A ? B）/A * 100%       (C3)

式中： X₅――抑菌率，%；

        A――被试样品震荡前均值菌体数；

        B――被试样品震荡后均值菌体数。

C5.2  点评规范

不用样片组的菌体数在1*10⁴-9*10⁴cfu/ mL中间，且试品振荡前后左右均值菌落数差值在10%之内，实验合理；被试样片组抑菌率与对仍然片组抑菌率的差值＞26%，商品具备抗菌功效。

C6  稳定性测试方式

C6.1  检测标准

C6.1.1  当然备用：将原包裝试品置棚温下最少1年，半年开展抑菌或除菌性能指标。

C6.1.2  加快实验：将原包裝试品置54-57℃恒温箱内14天或37-40℃恒温箱内3个月，维持空气湿度＞75%，开展抑菌或除菌性能指标。

C6.2  点评规范

商品经当然备用，其除菌率或抑菌率做到附则C3或附录C4、附则C5中要求的指标值，商品的除菌或抑菌功效在棚温下的维持時间即是当然备用時间。

商品经54℃加快实验，其除菌率或抑菌率做到附则C3或附录C4、附则C5中要求的指标值，商品的除菌或抑菌功效在棚温下最少维持一年。

商品经37℃加快实验，其除菌率或抑菌率做到附则C3或附录C4、附则C5中要求的指标值，商品的除菌或抑菌功效在棚温下最少维持二年。

附则D

（规范的附则）

商品环氧乙烷残余量测试标准

D1  检测目地

明确商品消毒杀菌后开启時间，当新品或原料、消毒杀菌加工工艺更改很有可能影响到商品物理化学特性时应予以检测。

D2  试品收集

环氧乙烷消毒杀菌后，马上从统一消毒杀菌生产批号的三个纸袋包装中随机抽取一定量小袋装试品，取样量最少应达到要求所需测量频次的量（留一定量在有必要时开展进行复测用）。

各自于环氧乙烷消毒杀菌后24h及之后每隔数日开展残留量测定，直至残留量降至本规范4.6所要求的标准值下列。

D3  仪器设备与实际操作标准

仪器设备：气相色谱、氢焰探测器（FID）

柱：Choromosorb 101 HP60-80目；夹层玻璃柱长2m，Φ3nm。柱温：120℃.

探测器：150℃。

汽化器：150℃。

载供气量：氢气：35mL/min。

         氡气：35mL/min。

         气体：350mL/min。

柱前压约为108kPa。

D4.1  规范配置

用100mL夹层玻璃针管从纯环氧乙烷小气瓶中提取环氧乙烷标准气体（反复放空自己二次，以清除原来气体），塞外橡皮头，用10mL针管提取以上100mL针管中纯环氧乙烷标准气体10mL，用氢气稀释液到100mL（可将10mL标准气体引入到已经有90mL氢气的带橡皮塞头的针管中进行）。用一样的方式依据需用再逐步稀释液2-3次（稀释1000-10000倍），作三个浓度值的标准气。按环氧乙烷小气瓶中环氧乙烷的纯净度、稀释倍数和棚温测算出最终标准气体中的环氧乙烷浓度值。

计算方法如下所示：

        

式中：c――标准气浓度值，ug/mL；

       k――稀释倍数；

       t――棚温，℃。

D4.2  试品解决

最少取2个最小包裝商品，将其剪下来，任意精准称量2g，放进提纯器皿中，添加5mL去离子水，充足混匀，置放4h或震荡30min备用。如被检试品为吸水树脂原材料商品，科适度提升去离子水量，以保证最少可吸出2mL样液。

D4.3  剖析

待仪器设备平稳后，在相同标准下，环氧乙烷标准气各气相1.0mL，待剖析试品（溶液）各气相2uL，每一样液平行面作2次测量。

依据保存期判定，依据峰总面积（或基线噪声）开展定量分析测算，取均值。

D4.4  测算

以所进环氧乙烷标准气体的mg（ug）数对所得的峰总面积（或基线噪声）作环氧乙烷工作中曲线图。

以试品中环氧乙烷相匹配的峰总面积（或基线噪声）在工作中曲线图上求取环氧乙烷的量A（ug），并且以式（D2）求取商品中环氧乙烷的残余量。

              

式中：X――商品环氧乙烷残余量，ug/g；

       A――从工作中曲线图中常查得环氧乙烷量，ug；

       M――所取试品量，g；

V_（萃）――提取液容积，mL；

V_（进）――进样量，mL。

 

附录E

（标准的附录）

生产环境采样与测试方法

E1  气体采样与测试方法

E1.1  试品收集

在信息下开展。

棚里总面积不超过30m²，在对角里设里、中、外三点，里、外点部位离墙1m；棚里总面积超出30m²，设东、西、南、北、中5点，周边4点距墙1m。

采样时，将含营养成分琼脂培养液的平板电脑（直徑9cm）置采样点（约桌面上相对高度），开启培养皿盖，使平板电脑在空气中曝露5min。

E1.2  细菌检查

在采样前将准备好的营养成分琼脂培养液置35℃±2℃塑造24h，取下查验有零污染，将环境污染培养液去除。

将已收集的培养液在6h内送试验棚，于35℃±2℃塑造48h观查結果，记数平板电脑上细菌菌落数。

E1.3  菌体测算

              

 式中：y₁――空气中细菌菌落数量，cfu/m³；

        A――平板电脑上均值细菌菌落数；

        S₁――平板电脑总面积，cm²；

         t――暴露时间，min。

E2  操作台表层与职工手表层取样与测试标准

E2.1  试品收集

操作台：将经杀菌的公称直径为5cm*5cm的杀菌规格型号板放到被检物件表层，用一浸有杀菌盐水的棉球在其中擦抹10次，随后剪去手触碰一部分棉签，将棉球放进含10mL杀菌盐水的取样管中复检。

E2.2  病菌菌落总数检测

将已收集的样本在6h内送试验棚，每一个取样管充足搅拌后取1mL样液，放进杀菌培养皿内，竭尽营养成分琼脂培养液，每一个试品平行面注射二块培养皿，置35℃±2℃塑造48h观查結果，记数平板电脑上细菌菌落数。

            

式中：y₂――操作台表层细菌菌落数量，cfu/cm²；

       A――平板电脑上均值细菌菌落数；

      S₂――取样总面积，cm²；

      y₃――职工手表层细菌菌落数量，cfu/支手。

E2.3  致病菌检测

按本规范附则B开展。

 

附则F

（规范的附则）

消毒杀菌实际效果微生物检测评价方法

F1  环氧乙烷消毒杀菌

F1.1  环氧乙烷消毒杀菌实际效果点评用微生物指示菌为枯草杆菌灰黑色变异芽胞（ATCC 9372）。在菌量为5*10⁵-5*10⁶cfu/片、环氧乙烷浓度值为600mg/L±30mg/L、功效溫度为54℃±2℃、空气湿度为60%±10%标准下，其消灭90%微生物所需時间D值应是2.5-5.8min，生存時间≥7.5min，消灭時间≤58min。

F1.2  每一次检测最少布线10片生物指示剂，放于较难消灭处。消毒杀菌结束，取下指示菌片注射鹰眼侠骨头汤栽培基质作判定检验或注射营养成分琼脂培养液作定量分析检验，将没有处理阳性对照菌片作同样注射，二者均置35℃±2℃塑造。阳性对照应在24h内有菌生长发育。判定塑造试品如持续观查7天所有无菌检测生长发育，可汇报生物指示剂塑造呈阴性，消毒杀菌达标。定量分析塑造试品与阳性对照对比消灭指数值做到10³也可汇报消毒杀菌达标。

F2  电磁波辐射消毒杀菌

F2.1  电磁波辐射消毒杀菌实际效果点评 用微生物指示菌为简短链球菌芽胞E601（ATCC 27142），在菌量为5*10⁵-5*10⁶cfu/口腔上皮细胞，其消灭90%微生物所需使用量D₁₀值应是1.7kGy。

F2.2  每一次检测最少选5箱，每件商品布线3片生物指示剂，置最少使用量处。消毒杀菌结束，取下指示菌片注射营养成分骨头汤栽培基质作判定检验或注射营养成分琼脂培养液作定量分析检验，将没有处理阳性对照菌片作同样注射，二者均置35℃±2℃塑造。阳性对照应在24h内有菌生长发育。判定塑造试品如持续观查7天所有无菌检测生长发育，可汇报生物指示剂塑造呈阴性，消毒杀菌达标。定量分析塑造试品与阳性对照对比消灭指数值做到10³也可汇报消毒杀菌达标。

F3  工作压力蒸汽消毒

参考GB15981-1995的要求实行。

 

附则G

（规范的附则）

培养液与具体制取

G1  营养成分琼脂培养液

成份：

  蛋白胨                            10g

  牛肉膏                             3g

  氧化钠                             5g

  琼脂                              15g-20g

  纯净水                            1000mL

制作方法：除琼脂外别的成份融解于纯净水中，调pH至7.2-7.4，添加琼脂，加温融解，散装试管婴儿，121℃杀菌15min储备用。

G2  乳清蛋白胆盐发醇管

成份：

  蛋白胨                            20g

  猪胆盐（或牛、羊胆盐）             5g

  乳清蛋白                              10g

      0.04%溴甲酚紫溶液               25mL

  纯净水                            加至1000mL

制作方法：将蛋白胨、胆盐及乳清蛋白溶解水里，校准pH至7.4，添加显色剂，散装没管50mL，并放进一个小倒管，115℃杀菌15min，即得。

G3  乳清蛋白发醇管

成份：

  蛋白胨                            20g

  乳清蛋白                              10g

      0.04%溴甲酚紫溶液               25mL

  纯净水                            加至1000mL

制作方法：将蛋白胨及乳清蛋白溶解水里，校准pH至7.4，添加显色剂，散装每管10mL，并放进一个小倒管，115℃杀菌15min，即得。

G4  伊红美蓝琼脂（EMB）

成份：

  蛋白胨                            10g

  乳清蛋白                              10g

      磷酸氢二钾                         2g

      琼脂                              17g

      2%伊红Y饱和溶液                      20mL

0.65%美蓝溶液                     10mL

  纯净水                            加至1000mL

制作方法：将蛋白胨、聚磷酸盐和琼脂融解于纯净水中，校准pH至7.1，散装与圆底烧瓶内，121℃杀菌15min预留，临用时添加乳清蛋白并加温融化琼脂，冷至55℃，添加伊红和美蓝饱和溶液混匀，竭尽平板电脑。

G5  SCDLP 液体培养基

成份：

 opo结构脂胨                           17 g

 黄豆蛋白胨                          3 g

 氧化钠                              5 g

 磷酸氢二钾                        2.5 g

 葡萄糖水                            2.5 g

大豆卵磷脂                              1 g

 司盘80                              7 g

 纯净水                            1000 mL

制作方法：将各种各样成份混和(如无opo结构脂胨和黄豆蛋白胨可以用日本多胨替代)，加温融解，调pH至7.2～7.3，散装，121℃杀菌20min，混匀，防止司盘80沉到底端，冷至25℃后应用。

G6  十六烷三丙基溴化铵培养液

成份：

牛肉膏                              3 g

  蛋白胨                             10 g

  氧化钠                              5 g

  十六烷三羟基溴铵                  0.3 g

  琼脂                               20 g

  纯净水                           1000 mL

制作方法：除琼脂外，以上各成份混和加温融解，调pH至7.4～7.6，随后添加琼脂，115℃杀菌20 min，冷至55℃上下竭尽培养皿。

G7  绿脓菌素测量用培养液斜坡

成份：

  蛋白胨                             20 g

  氧化镁                            1.4 g

  硫酸铵                             10 g

  琼脂                               18 g

  凡士林(化学纯)                       10g

  纯净水                          加至1 000 mL

制作方法：将蛋白胨、氧化镁和硫酸铵加到纯净水中，加温融解，调pH至7.4，添加琼脂和凡士林，加温融解，散装试管婴儿，115℃杀菌20 min，做成斜坡预留。G8  果胶培养液

成份：

  牛肉膏                              3 g

  蛋白胨                              5 g

  果胶                               120 g

  纯净水                             1 000 mL

制作方法：各成份添加纯净水中泡浸20 min，加温混合融解，调pH至7.4，5 mL散装试管婴儿中，115℃ 杀菌20 min，站立做成高层住宅预留。

G9  磷酸盐蛋白胨水培养液

成份：

  蛋白胨                             10 g

  酵母浸膏                            3 g

  硝酸钾                              2 g

  亚硝酸钠                          0.5 g

  纯净水                            1000 mL

制作方法：将蛋白胨与酵母浸膏加到纯净水中，加温融解，调pH至7.2，烧开过虑后补充水率，添加硝酸钾和亚硝酸钠融解匀称，散装到有小倒管的试管婴儿中，115℃杀菌20 min备用。

G10  血琼脂培养液

成份：

营养成分琼脂                           100 mL

  脱纤维羊血(或兔血)                  10 mL

制作方法：将杀菌后的营养成分琼脂加温融化，凉至55℃上下，用无菌检测方式将10 mL脱化学纤维血添加后混匀，竭尽培养皿置电冰箱备用。

G11  甘油果糖发醇培养液

成份：

  蛋白胨                             10 g

  牛肉膏                              5 g

  氧化钠                              5 g

  甘油果糖                             10 g

 0.2％溴麝香草酚蓝饱和溶液              12 mL

纯净水                            1000 mL

 制作方法：将蛋白胨、氧化钠、牛肉膏加到纯净水中，加温融解，调pH至7.4，添加甘油果糖和溴麝香草酚蓝搅拌后，散装试管婴儿，115℃杀菌20 min备用。

G12  葡萄糖肉汤

成分：

　蛋白胨                             10 g

  牛肉膏                              5 g

  氧化钠                              5 g

  葡萄糖                             10 g

纯净水                            1000 mL

制作方法：以上成分溶解纯净水中，调pH至7.2～7.4，加温融解，散装试管婴儿，121℃杀菌15min储备用。

G13  兔血液

制作方法：取杀菌3.8％三聚磷酸钠1份，兔全血4份，搅拌静放，3 000 r/min离心式5 min，取上清，弃血球。

G14  沙氏琼脂培养液

  蛋白胨                             10 g

  葡萄糖                             40g

  琼脂                               20g

纯净水                            1000 mL

用700 mL蒸馏水将琼脂融解，300 mL纯净水将葡萄糖水与蛋白胨融解，混和以上两一部分，混匀后散装，115℃杀菌15 min，即得。应用前，用过滤除菌方式添加0.1g/L的氯霉素或是0.03g/L的氨苄青霉素。

判定实验选用沙氏栽培基质，即除不用琼脂外别的成份与制作方法跟上面一样。

G15  营养成分骨头汤栽培基质

  蛋白胨                             10 g

  氧化钠                              5 g

  牛肉膏                              3 g

纯净水                            1000 mL

调整pH使杀菌后为7.2～7.4，散装，115℃杀菌30 min，即得。

G16  溴甲酚紫葡萄糖水蛋白胨水培养液

  蛋白胨                             10 g

  葡萄糖水                               5g

纯净水                            1000 mL

调整pH至7.0～7.2，加2％溴甲酚紫酒精溶液0.6 mL，115℃ 杀菌30 min，即得。

G17  革兰氏染色液

结晶紫上色液：

结晶紫                              1 g

 95％乙酸乙酯                           20 mL

  1％草酸铵溶液                    80 mL

将结晶紫融解于乙酸乙酯中，随后与草酸铵饱和溶液混和。

革兰氏阳性菌碘液：

结晶紫                              1 g

碘                                  1 g

  碘酸钾                              2 g

  纯净水                             300 mL

脱色剂

95％乙酸乙酯

复染液：

(1)沙黄复染液：

沙黄                               0.25 g

  95％乙酸乙酯                            10 mL

纯净水                              90 mL

将沙黄融解于乙酸乙酯中，随后用纯净水稀释液。

(2)稀石炭酸复红液

称量偏碱复红10g，研细，加95％乙酸乙酯100mL，置放留宿，过滤纸过虑。取该液10mL，加5％石炭酸溶液90mL混和，即是石炭酸复红液。再取此液10mL，放水90mL，即是稀石炭酸复红液。

G18  0.03 mol/L磷酸盐缓冲液（PBS，pH7.2）

成份：

磷酸氢二钠                       2.83 g

  磷酸二氢钾                       1.36 g

 纯净水                           1000 mL

全文由来：http://www.dcjjp.com/